Las mejoras en los tratamientos oncológicos han mejorado las tasas de supervivencia de niñas y mujeres jóvenes con cáncer, lo que ha dado lugar a una mayor preocupación sobre la calidad de vida posterior al tratamiento, incluyendo, entre otros, la salud reproductiva. Dada la pérdida potencial de la fertilidad, como efecto secundario del tratamiento, se hace necesaria la implementación de medidas para la preservación y restauración de la fertilidad de dichas pacientes. Así, la criopreservación de tejido ovárico, ovocitos y embriones es una opciones actualmente disponible para preservar la fertilidad antes de iniciar el tratamiento oncológico. Sin embargo, para muchas pacientes con cáncer, el tratamiento hormonal requerido para las Técnicas Convencionales de Reproducción Asistida (TRA) está contraindicado o, simplemente, el tiempo para someterse a ellas, sin posponer el tratamiento oncológico, es insuficiente. En estos casos, la Maduración In Vitro (MIV) de ovocitos ofrece una opción importante para preservar la fertilidad. Debido a que la MIV utiliza ovocitos inmaduros, provenientes de folículos antrales en desarrollo, cuya capacidad para generar un embrión es limitada, los resultados clínicos son aún más bajos que los obtenidos con TRA convencionales (FIV o ICSI). De esta forma, el objetivo principal de esta propuesta es optimizar un protocolo de Maduración In Vitro (MIV) para ovocitos provenientes de folículos antrales pequeños, en el modelo bovino, y explorar su potencial para fines de preservación de la fertilidad en pacientes con cáncer (adultas, adolescentes y pediátricas). Con la presente propuesta, se plantea la generación y desarrollo de conocimientos y tecnología de primer nivel en un área que aún no se desarrolla en nuestro país.

En la última década, el progreso en los tratamientos oncológicos ha permitido un incremento en la tasa de supervivencia de los pacientes. En Perú, se espera que los cambios efectuados en la política de salud, en cuanto a prevención y acceso a dichos tratamientos (Plan Esperanza, 2012), repercutan positivamente con un incremento en la tasa de supervivencia a nivel nacional. De acuerdo a lo que ocurre en países del hemisferio norte, se estima que al menos 1 en 100 mujeres en edad fértil (15-44 años) será una sobreviviente de cáncer. Para el Perú, esto se traduciría en miles de mujeres, considerando que en la actualidad más de 7,500,000 de ellas corresponde al grupo de edad reproductiva. Sin embargo, como resultado del uso de terapias más efectivas, pero a la vez, muchas de ellas, gonadotóxicas, la fertilidad se ve seriamente afectada originando, a futuro, un impacto en la calidad de vida. Estudios previos en sobrevivientes de cáncer (en Norte-América y Europa) han revelado que la infertilidad es una de las complicaciones más difíciles que enfrentan los pacientes oncológicos, a largo plazo. Actualmente, en varios países desarrollados, se ofrece la criopreservación de gametos y tejidos gonadales con el fin de preservar la fertilidad antes de iniciar el tratamiento oncológico. El almacenamiento de dichos tejidos ofrece la posibilidad real para restaurar la fertilidad, una vez que los pacientes están libres de enfermedad.

De acuerdo al reporte “Análisis de la situación del cáncer en el Perú, 2013”, el 23.4 % de los casos de cáncer reportados en mujeres (entre el 2006-2011), ocurren en edad reproductiva. Asimismo, 3.5 % de los casos de cáncer reportados ocurren en niños y adolescentes en pubertad (0-14 años). Por tanto, las estrategias reproductivas para preservar y restaurar la fertilidad beneficiarían a sectores vulnerables importantes de nuestra población como es el caso de: i) pacientes (hombres y mujeres) diagnosticados con cáncer (en edad reproductiva o que hayan pospuesto la paternidad/maternidad por motivos de desarrollo personal-profesional) y ii) niños y adolescentes. En nuestro país, profesionales en el área de reproducción y oncología, sobretodo oncólogos pediatras, han mostrado un gran interés en este campo debido a la necesidad de mejorar calidad de vida de los pacientes que vencen la enfermedad.

En este contexto, considerando que, para muchas de las pacientes con cáncer, el tratamiento hormonal requerido para los TRA convencionales está contraindicado y que el tratamiento oncológico no puede esperar, la MIV de ovocitos ofrece una alternativa importante para la preservación de la fertilidad. Esta es una tecnología reproductiva para la cual la estimulación ovárica no es un paso crítico para la obtención de ovocitos.

Para dichas pacientes, esta estrategia permitiría obtener de forma inmediata los ovocitos para ser madurados in vitro, en un periodo estimado de 1 a 3 días de cultivo, seguido de la criopreservación de ovocitos maduros y/o de embriones. Debido a que la MIV utiliza ovocitos inmaduros de folículos antrales medianos y pequeños, que aún necesitan completar su desarrollo para poder generar un embrión, los resultados clínicos obtenidos con esta técnica son más bajos que los obtenidos con TRA convencionales (FIV o ICSI).

Las mejoras en la efectividad y eficiencia de la MIV de ovocitos, considerada, además, como un tratamiento menos invasivo y menos costoso, permitirían ampliar el uso de esta técnica para pacientes que estén en riesgo de desarrollar el síndrome de hiperestimulación ovárica (como las pacientes con ovarios poliquísticos); y, sobre todo, para la preservación de la fertilidad de pacientes con cáncer. Asimismo, muchas especies de interés en el ámbito ganadero, que hacen uso de esta tecnología reproductiva para producir embriones, se beneficiarían de los avances logrados a través de esta investigación.

En la actualidad, muchas de las pacientes diagnosticadas con cáncer no pueden someterse a TRA convencionales debido a que la administración de hormonas destinadas a la hiperstimulación ovárica está contraindicada o el tiempo para someterse a TRA, sin posponer el inicio del tratamiento oncológico, es limitado. En estos casos, la MIV de ovocitos, sin estimulación ovárica previa, sería la mejor alternativa para dichas pacientes, ya que permitiría la obtención inmediata de ovocitos para ser madurados en el laboratorio, seguido de la criopreservación de ovocitos maduros y/o de embriones. Sin embargo, la MIV de ovocitos es una tecnología reproductiva cuyos resultados clínicos aun no son óptimos en comparación a las TRA convencionales; uno de los mayores desafíos técnicos es el desarrollo de condiciones de cultivo óptimos para ovocitos “inmaduros” provenientes de folículos antrales pequeños. La disponibilidad de material biológico humano para investigación es insuficiente y restringido debido a temas éticos.

Así, nuestra investigación planea basarse en el modelo bovino, ya que es un modelo de investigación traslacional importante (Sirard et al., 2017); además de que sirve como modelo para el caso humano, aunque el modelo bovino de MIV también requiere de ajustes importantes para mejorar los resultados. A la fecha, la producción de blastocistos por ovocito fecundado es de aproximadamente 35 %, lo cual es considerado subóptimo. El principal problema recae en que dichos protocolos no discriminan entre los ovocitos en diferentes estadios de desarrollo, con lo cual se generan tasas de maduración, de fecundación y desarrollo embrionario bastante variables. Al utilizarse ovarios obtenidos del matadero, los complejos cúmulo-ovocito provienen de animales en diferentes fases del ciclo estral: fase folicular, fase ovulatoria o fase lútea. Por lo tanto, están expuestos a diferentes ambientes que afectan sus características y competencias.

En la presente propuesta planteamos utilizar un modelo de Maduración In Vitro desarrollado por nuestro equipo de investigadores, el cual ha sido diseñado en el modelo murino y luego adaptado y aplicado con buenos resultados en pacientes con ovarios poliquísticos. Este modelo se enfoca primordialmente en el uso de ovocitos provenientes de folículos antrales de tamaño medio y pequeño; con relevancia en la sincronización de la calidad ovocitaria, en términos de la adquisición y sincronización de las competencia nuclear y citoplasmática. Estas competencias son las que permitirán que los ovocitos puedan completar la meiosis (competencia nuclear) y generar embriones (competencia citoplasmática) de buena calidad. El desarrollo de esta tecnología en el modelo murino planteó un escenario no contemplado hasta ese momento: la utilización de complejos cúmulo-ovocito a partir de folículos antrales pequeños, provenientes de ovarios de ratonas que no habían sido estimuladas con gonadotropinas. Tradicionalmente, se obtienen ovocitos luego de la administración de PMSG (Pregnant Mare Serum Gonadotropin); sin embargo, esto implica que los ovocitos se encuentran en estadíos más avanzados de desarrollo, pero a la vez limita las intervenciones (para mejorar los resultados) a la fase final del periodo de maduración.

La implementación de la tecnología descrita permitiría diseñar y ofrecer alternativas para preservar y restaurar la fertilidad en pacientes con cáncer que no pueden ser sometidas a un tratamiento hormonal convencional. Este es el caso también de pacientes pediátricas y adolescentes, para las cuáles (a la fecha) sólo se podría ofrecer el congelamiento de tejido ovárico). Por otro lado, en el ámbito ganadero se podrá mejorar la producción de embriones en el bovino. Lo mismo aplicaría para especies como la alpaca, que son animales de interés económico para los cuales la maduración in vitro de ovocitos es una herramienta necesaria y aún lejos de ser óptima.

Modalidad de proyecto: Proyecto de investigación avanzado

Los proyectos deben ser presentados de manera asociativa (con una o más entidades asociadas).

La conformación mínima es la siguiente:

• Un investigador principal
• Un coinvestigador
• Un tesista de posgrado
• Un gestor tecnológico
• Un coordinador administrativo:

Tipo de proyecto: Investigación aplicada

Subsector: Salud

Sector: General

Lugar de ejecución del proyecto: Lima

Fecha de inicio:  03/12/2018

Fecha de cierre:  03/06/2021

Plazo de ejecución (meses): 30

Objetivo principal

El objetivo principal de esta propuesta es optimizar un protocolo de Maduración In Vitro (MIV) para ovocitos provenientes de folículos antrales pequeños en el modelo bovino, y explorar su potencial para fines de preservación de la fertilidad para pacientes con cáncer. La optimización del protocolo de MIV, planteada en el presente proyecto, tiene como objetivo sincronizar los procesos de maduración nuclear y citoplasmática dentro del ovocito, para así adaptar las condiciones de cultivo de acuerdo con los requerimientos del éste. Este paso es crucial para la fertilización exitosa y el desarrollo embrionario previo y posterior a la implantación. Con la presente propuesta se plantea la generación y desarrollo de conocimientos y tecnología de primer nivel, en un área que aún no se desarrolla en nuestro país: la preservación y restauración de la fertilidad en pacientes con cáncer.

Objetivo específico 1

Determinar las características del material biológico que será utilizado para la Maduración In vitro de ovocitos en el modelo bovino

Objetivo específico 2

Evaluar la MIV de ovocitos de folículos antrales en el modelo bovino y optimizar el protocolo de MIV para ovocitos provenientes de folículos antrales tempranos adaptando las condiciones de cultivo

Objetivo específico 3

Evaluar el desarrollo embrionario de los ovocitos provenientes de MIV bajo la metodología propuesta en los objetivos específicos 1 y 2

Objetivo específico 4

Explorar la MIV de ovocitos de folículos antrales pequeños en el modelo humano (pacientes)

Institución responsable del proyecto

Universidad Peruana Cayetano Heredia

RUC: 20110768151

Tipo de entidad: Universidades que se encuentren licenciadas o en proceso de licenciamiento por la SUNEDU

Régimen: Privado

Tipo de organización: Sin fines de lucro

Departamento: Lima

Provincia: Lima

Distrito: San Martin de Porres

Dependencias: Laboratorio de Reproducción Animal, Laboratorio de Biología reproductiva y Preservación de la Fertilidad

Institución asociada

Centro de Fertilidad y Reproducción Asistida

RUC: 20501867412

Tipo de entidad: Empresas

Régimen: Privado

País: Perú

Departamento: Lima

Provincia: Lima

Distrito: San Borja

Investigador principal

Nombres: Luisa Inés

Apellido paterno: Echevarría

Apellido materno: Curee

Grado académico: Magister

Nombre del grado académico: Médico Veterinario

Entidad: Universidad Peruana Cayetano Heredia

Dependencia: Laboratorio de Reproducción Animal

Coinvestigador

Nombres: Johan Edgard

Apellido paterno: Smitz

Grado académico: Doctorado

Entidad: Universidad Peruana Cayetano Heredia

Dependencia: Laboratorio de Biología reproductiva y Preservación de la Fertilidad

Coinvestigador

Nombres: Flor Inés

Apellido paterno: Sánchez

Apellido materno: Ramos de Romero

Grado académico: Doctorado

Entidad: Universidad Peruana Cayetano Heredia

Dependencia: Laboratorio de Biología reproductiva y Preservación de la Fertilidad

Coinvestigador

Nombres: Sergio Jean Markos

Apellido paterno: Romero

Apellido materno: Loyola

Grado académico: Doctorado

Entidad: Universidad Peruana Cayetano Heredia

Dependencia: Laboratorio de Biología reproductiva y Preservación de la Fertilidad

Coinvestigador

Nombres: Francisco Rafael

Apellido paterno: Escudero

Apellido materno: Díaz

Grado académico: Magister

Entidad: Centro de Fertilidad y Reproducción Asistida

Dependencia: Dirección Médica

Tesista

Nombres: Tesista no identificado 3

Apellido paterno: –

Apellido materno: –

Tipo de tesis: Título Profesional

Entidad: Universidad Peruana Cayetano Heredia

Tesista

Nombres: Tesista no identificado 3

Apellido paterno: –

Apellido materno: –

Tipo de tesis: Maestría

Entidad: Universidad Peruana Cayetano Heredia

Gestor tecnológico

Nombres: Ciro Junior

Apellido paterno: Huerta

Entidad: Universidad Peruana Cayetano Heredia

Coordinador administrativo

Nombres: Eliana Brenilda

Apellido paterno: Alegre

Apellido materno: Gutiérrez

Entidad: Universidad Peruana Cayetano Heredia

Técnico

Nombres: Asistente de investigación

Apellidos: –

Entidad: Universidad Peruana Cayetano Heredia

Rubros financiables

• Recursos humanos (hasta 50% del monto financiado)

1. Incentivo monetario para el investigador principal y coinvestigadores: no debe sobrepasar el máximo de S/ 2,000 mensuales por investigador.
2. Pago a los tesistas: no debe sobrepasar el máximo de S/ 1,500 mensuales por tesista.
3. Pago al personal técnico o asistente de investigación: no debe sobrepasar el máximo de S/ 1,000 mensuales por técnico.
4. Honorarios o incentivos para un gestor tecnológico: no debe de sobrepasar el máximo de S/. 1,500 mensuales.

• Equipos y bienes duraderos (hasta 20% del monto financiado)

Corresponde a la adquisición de equipos menores para el proyecto de investigación.

• Materiales e insumos

1. Materiales, insumos, reactivos, accesorios, componentes electrónicos o mecánicos, bienes no inventariables.
2. Material bibliográfico, tales como manuales, bases de datos, libros especializados, otros, y/o suscripciones a redes de información (en físico o electrónico).
3. Software especializado para el desarrollo de los proyectos de investigación.

• Viajes

Corresponde a los gastos de viajes relacionados a actividades propias del proyecto de investigación.

Los gastos que aplican para este rubro son los siguientes:

1. Pasajes: terrestres, aéreos, nacionales e internacionales, en clase económica.
2. Viáticos: comprenden los gastos por concepto de alimentación, hospedaje y movilidad (hacia y desde el lugar de embarque), así como el desplazamiento en el lugar donde se realizan las actividades. El concepto de viáticos es aplicable para estancias cuya duración sea menor a los quince (15) días calendario, considerando los topes máximos diarios detallados en el Anexo 2.
3. Manutención: comprenden los gastos de alojamiento, alimentación y movilidad local durante su permanencia en el lugar sede del objeto del beneficio otorgado, o desplazamientos relacionados con el mismo. El concepto de manutención es aplicable siempre que se trate de una estancia cuya duración sea mayor o igual a quince (15) días calendario, considerando los topes máximos diarios detallados en la convocatoria.
4. Seguro de viaje: el seguro es de carácter obligatorio y su valor debe estar de acuerdo al precio de mercado. La cobertura típicamente incluye gastos médicos de emergencia, muerte accidental, invalidez e imprevistos logísticos durante el viaje (retraso de vuelos, demora o pérdida de equipaje, robos, etc.). El precio del seguro puede variar en función a la edad, duración del viaje y el destino. Se puede financiar hasta un máximo de S/ 2,000.

• Servicios de no consultoría.

Corresponde a los gastos de contratación de personas naturales o jurídicas para la ejecución de actividades de índole técnica especializada, consideradas como críticas para lograr el buen resultado del proyecto de investigación: servicios de laboratorio, colección de datos, procesamiento de muestras, análisis y diseño.

• Otros servicios

Corresponde a los gastos de contratación de personas naturales o jurídicas para la ejecución de actividades complementarias del proyecto de investigación, tales como:

1. Actividades de difusión:

1. Gastos de organización de taller de cierre del proyecto.
2. Costo de publicación de artículos en revistas indizadas.

• Costo de inscripción para participar en eventos o para discutir los resultados con personal interesado o calificado.

1. Actividades complementarias de la investigación:

1. Gastos de importación y desaduanaje de materiales, insumos o equipos relacionados al proyecto de investigación que se adquieran en el extranjero.
2. Gastos relacionados a la obtención del título o grado.

• Gastos relacionados a la solicitud de patentes.

1. Gastos de mantenimiento correctivo para los equipos adquiridos u otro equipo de laboratorio que deba usarse en el proyecto.

• Gastos de gestión (hasta 10% del monto financiado)

Corresponde al incentivo monetario para el coordinador administrativo, útiles de oficina y servicios de imprenta.