La presencia de Pseudomonas aeruginosa multirresistente (PAMR), en nuestros centros hospitalarios, es cada vez más frecuente, principalmente en las unidades de hospitalización como la de cuidados intensivos, lo cual atenta contra el bienestar de las sociedades actuales. Los controles comunes mediante la administración de antibióticos son poco efectivos contra las PAMR, por lo cual se propone el empleo de nuevas tecnologías, como la utilización de bacteriófagos específicos. En este estudio se desarrolla una formulación (cóctel) de bacteriófagos procedentes de distintas muestras de agua, probadas con diversas cepas de PAMR, procedente de centros hospitalarios, lo cual involucra el estudio de sus características fenotípicas y genotípicas; para lo cual se realizará el aislamiento de bacteriófagos de eficacia por medio de la prueba de la gota, titulación de lisados fágicos y de cinética de infección. https://t.ly/6kDF  

De acuerdo a la OMS, en EE. UU. mueren anualmente cerca de 14,000 personas por infecciones resistentes a los medicamentos. Internacionalmente, el 60 % de las infecciones reportadas son resistentes a los agentes antimicrobianos. Mientras que en América Latina las cepas bacterianas más peligrosas han sido denominadas ESKAPE: En. faecalis, St. aureus, Kl., Ac. baumanii, Ps. aeruginosa y E. coli. Aproximadamente el 70 % de las bacterias que causan infecciones en hospitales son resistentes al menos a uno de los antibióticos de primera línea; sin embargo, algunas de estas bacterias son resistentes a todos los antibióticos aprobados y son únicamente tratadas con medicamentos experimentales y potencialmente tóxicos. La multirresistencia ha adquirido tal importancia, que la OMS ha identificado este problema como la quinta amenaza para la salud humana y sus consecuencias generan múltiples campañas para intentar controlar esta situación.

La Pseudomonas aeruginosa multirrsistente (PAMR) forma parte de un grupo de microorganismos llamados “problema o conflictivos”, junto con Enterococcus resistente a vancomicina (ERV), S. aureus resistente a la meticilina (SARM), Enterobacterias multirresistentes (BLEE) y Ac. baumannii; por lo que tienen en común la gravedad de infecciones causadas y las dificultades terapeúticas. Así, se han diseñado múltiples estudios con diferentes definiciones que dificultan el conocimiento del verdadero impacto clínico de este problema. Dentro de las definiciones de “mulirresistencia”, la más utilizada es la resistencia demostrada ante antibióticos de tres o más familias de antipseudomómicos, entre los que se incluyen penicilinas antipseudomónicas (piperacilina), cefalosporinas (ceftazidima, cefepime), carbapenems (imipenem, meropenem, doripenem), fluroquinolonas (ciprofloxacina), aminoglicósidos (gentamicina, tobramicina, amikacina), monobactam (aztreonam) y polimixinas (colistina).

Lo anterior permite concluir que la solución no es la generación de nuevos antibióticos que a corto plazo se tornarán Ineficaces, sino que es necesario ensayar otras posibilidades terapéuticas para el control efectivo, muy particularmente contra El PAMR, por ser un patógeno de relevancia clínica. Una de estas es el empleo de bacteriófagos, de los cuales tenemos ya un amplio conocimiento y, dada la creciente necesidad de evaluar nuevas alternativas distintas a los antimicrobianos convencionales, con renovado interés. Estos preparados fágicos han sido ampliamente utilizadas en la clínica y las actuales formulaciones consisten en mezclas polivalentes de fagos anti-disentería, anti-salmonella, anti-coliproteus, anti-estafilococos, anti-Ps. aeruginosa, anti-Kl. pneumoniae y anti-estreptococos para aumentar su espectro lítico. Otra estrategia para mejorar la eficacia es la terapia combinada de fagos y antibióticos contra infecciones, lo cual ha sido demostrado bajo condiciones in vivo como in vitro. Sin embargo, la aplicación clínica debe sugerir realizar estudios con las actuales tecnologías moleculares disponibles para las caracterizaciones de los virus, para de esa manera garantizar una mejor y mayor efectividad e inocuidad en el ser humano. Por ello, el objetivo de la presente propuesta es desarrollar un cóctel de bacteriófagos líticos frente a PAMR, el que debe involucrar previamente el aislamiento de una colección de fagos propios de nuestro medio; la evaluación de su estabilidad frente a diferentes condiciones físico-químicas, rango de huéspedes y otros; la selección de los fagos idóneos para ser sometidos al análisis molecular de su genética; y finalmente, efectuar ensayos bajo condiciones in vitro e in vivo (modelo murino) sobre la eficacia de la formulación. Todo ello deberá conducir a su pronta aplicación terapéutica, así como su empleo a través de otras aplicaciones alternativas como desinfectante de ambientes sépticos o su potencial aplicación en la industria alimentaria.

La fagoterapia es un tratamiento antimicrobiano con gran potencial para el control de infecciones y contaminación bacteriana en personas, animales, productos de consumo humano y productos agrícolas, entre otros. Desde su descubrimiento, los fagos se han utilizado con fines terapéuticos y han demostrado su efectividad, tanto in vivo como in vitro, sin producir efectos adversos ni toxicidad. Aunque el estudio de fagoterapia lleva casi un siglo, aún hace falta un mayor soporte científico para posicionarla como terapia a nivel mundial; se requieren datos confiables sobre la estabilidad de los bacteriófagos bajo diferentes condiciones, sobre la interacción del bacteriófago con su hospedero y sobre los mecanismos de respuesta de los bacteriófagos frente a la resistencia bacteriana. De otro lado, se requiere de la interacción entre diversos sectores para la definición de las regulaciones que permitan su comercialización y el uso seguro de preparados de bacteriófagos con fines terapéuticos, así como un gran esfuerzo de comunicación a la sociedad sobre sus beneficios.

Está claro que nos encontramos ante una terapia prometedora que, empleada junto con los antibióticos, puede proporcionar un medio muy eficaz para combatir el preocupante problema de las resistencias bacterianas, entre ellas la promovida por la Pseudomonas aeruginosa multirresistente (PAMR), responsable de un sinnúmero de procesos infecciosos, los cuales hoy en día se constituyen como un serio problema de controlar debido a las patologías que desarrolla. Así, podría ser una alternativa al uso generalizado de antibióticos, frente a los graves problemas actuales de infecciones por Pseudomonas.

Nuestro grupo de trabajo es consciente de la lucha contra el creciente y angustiante problema de la resistencia presentada en Pseudomonas, así como que los actuales avances científicos han mejorado el conocimiento de los fagos y, dada la creciente necesidad de evaluar nuevas alternativas distintas a los antimicrobianos convencionales, renueva su interés en el estudio de éstas partículas fágicas con propiedades terapéuticas.

Por lo que tenemos la expectativa de aislar y caracterizar a todo un conjunto de bacteriófagos que puedan potencialmente controlar a distintos tipos de Pseudomonas aeruginosa multirresistentes que presenten diversos patrones de resistencia frente a diversos fármacos empleados en la actualidad; ello con la perspectiva de lograr a futuro el poder formular un cóctel de fagos capaces de poder controlar procesos infecciosos generados por este patógeno o, a la vez, poder ser utilizados como desinfectantes naturales en la industria.

Modalidad de proyecto: Proyecto de investigación avanzado

Los proyectos deben ser presentados de manera asociativa (con una o más entidades asociadas).

La conformación mínima es la siguiente:

• Un investigador principal
• Un coinvestigador
• Un tesista de posgrado
• Un gestor tecnológico
• Un coordinador administrativo

Tipo de proyecto: Investigación aplicada

Subsector: Salud

Sector: General

Lugar de ejecución del proyecto: La Libertad

Fecha de inicio:  01/12/2018

Fecha de cierre:  01/12/2021

Plazo de ejecución (meses): 36

Objetivo Principal

La fagoterapia es la aplicación de bacteriófagos específicos contra bacterias, con el propósito de eliminar patógenos; hoy en día, se está convirtiendo en una aplicación tecnológica de gran trascendencia, sobre todo en salud humana. De otro lado, Pseudomonas aeruginosa es el patógeno de mayor relevancia clínica y epidemiológica en el Perú, principal responsable de infecciones hospitalarias entre los gramnegativos y la mayor causa de infecciones oportunistas en pacientes inmunocomprometidos. Este patógeno está asociado a infecciones hospitalarias severas, principalmente en pacientes con infección pulmonar con fibrosis quística, quemaduras, otitis, queratitis, sepsis y en aquellos que se encuentran hospitalizados en las UCI.

Sin embargo, resulta preocupante el incremento de aislamientos clínicos de la PAMR resistente a antibióticos (betalactámicos, fluroquinolonas, aminoglicósidos y otros) y es considerado por la comunidad científica internacional como un patógeno multirresistente. Este microorganismo está bajo continua presión selectiva en centros hospitalarios, lo que ha conllevado a que desarrolle diversos mecanismos de resistencia con gran impacto clínico, ya que compromete la eficacia de casi todas (o incluso todas) las drogas utilizadas como tratamiento, y, a la vez, acarrea un alto costo de tratamiento en los pacientes, además del aumento del tiempo de hospitalización y de la mortalidad.

Por lo señalado, nuestro grupo de investigación está convencido de que los fagos constituyen una alternativa eficaz en el tratamiento de infecciones por PAMR, lo que evitaría el problema de la resistencia antibiótica, lo cual ha sido plenamente demostrado; por ello, tenemos como objetivo principal el desarrollar una formulación (cóctel) de bacteriófagos líticos, en la prevención y biocontrol de PAMR a antimicrobianos, bajo condiciones in  vitro e in vivo.

Objetivo específico 1

Establecer una colección de PAMR procedentes de aislados clínicos de la ciudad de Trujillo, y una colección de sus correspondientes bacteriófagos líticos procedentes de colectores cercanos a centros hospitalarios (Hospital Belén, Hospital Regional Docente, Hospital Víctor Lazarte Echegaray) de la ciudad de Trujillo, Perú.

Objetivo específico 2

Caracterizar la estabilidad físico-química, rango de huésped y de almacenamiento de los bacteriófagos líticos aislados de PAMR.

Objetivo específico 3

Desarrollar el análisis genómico de los bacteriófagos líticos seleccionados de PAMR.

Objetivo específico 4

Formular un cóctel de bacteriófagos líticos de PAMR y evaluar su actividad in vivo e in vitro.

Institución responsable del proyecto

Universidad Privada Antenor Orrego

RUC: 20141878477

Tipo de entidad: Universidades que se encuentren licenciadas o en proceso de licenciamiento por la SUNEDU

Régimen: Privado

Tipo de organización: Sin fines de lucro

Departamento: La Libertad

Provincia: Trujillo

Distrito: Trujillo

Dependencia: Laboratorio de Microbiología Molecular y Biotecnología – UPAO

Institución asociada

Universidad Nacional de Trujillo

RUC: 20172557628

Tipo de entidad: Universidades que se encuentren licenciadas o en proceso de licenciamiento por la SUNEDU

Régimen: Público

País: Perú

Departamento: La Libertad

Provincia: Trujillo

Distrito: Trujillo

Investigador principal

Nombres: José

Apellido paterno: González

Apellido materno: Cabeza

Grado académico: Doctorado

Nombre del grado académico: Doctorado en Ciencias Biológicas

Entidad: Universidad Privada Antenor Orrego

Dependencia: Laboratorio de Microbiología Molecular y Biotecnología – UPAO

Coinvestigadores

Nombres: Ofelia Magdalena

Apellido paterno: Córdova

Apellido materno: Paz Soldán

Grado académico: Doctorado

Entidad: Universidad Privada Antenor Orrego

Dependencia: Laboratorio de Microbiología Molecular y Biotecnología – UPAO

Nombres: Franklin Roger

Apellido paterno: Vargas

Apellido materno: Vásquez

Grado académico: Doctorado

Entidad: Universidad Nacional de Trujillo

Dependencia: Instituto de Investigación de Microbiología y Parasitología Tropical (INIMYPAT) – UNT

Tesistas

Nombres: Tesista no identificado 3

Apellido paterno: –

Apellido materno: –

Tipo de tesis: Licenciatura

Entidad: Universidad Privada Antenor Orrego

Nombres: Tesista no identificado 3

Apellido paterno: –

Apellido materno: –

Tipo de tesis: Maestría

Entidad: Universidad Privada Antenor Orrego

Gestor tecnológico

Nombres: Carmen Cecilia

Apellido paterno: Carranza

Apellido materno:

Entidad: Universidad Privada Antenor Orrego

Coordinador administrativo

Nombres: Mario

Apellido paterno: Zapata

Apellido materno: Cruz

Entidad: Universidad Privada Antenor Orrego

Rubros financiables

• Recursos humanos (hasta 50% del monto financiado)

1. Incentivo monetario para el investigador principal y coinvestigadores: no debe sobrepasar el máximo de S/ 2,000 mensuales por investigador.
2. Pago a los tesistas: no debe sobrepasar el máximo de S/ 1,500 mensuales por tesista.
3. Pago al personal técnico o asistente de investigación: no debe sobrepasar el máximo de S/ 1,000 mensuales por técnico.
4. Honorarios o incentivos para un gestor tecnológico: no debe de sobrepasar el máximo de S/. 1,500 mensuales.

• Equipos y bienes duraderos (hasta 20% del monto financiado)

Corresponde a la adquisición de equipos menores para el proyecto de investigación.

• Materiales e insumos

1. Materiales, insumos, reactivos, accesorios, componentes electrónicos o mecánicos, bienes no inventariables.
2. Material bibliográfico, tales como manuales, bases de datos, libros especializados, otros, y/o suscripciones a redes de información (en físico o electrónico).
3. Software especializado para el desarrollo de los proyectos de investigación.

• Viajes

Corresponde a los gastos de viajes relacionados a actividades propias del proyecto de investigación.

Los gastos que aplican para este rubro son los siguientes:

1. Pasajes: terrestres, aéreos, nacionales e internacionales, en clase económica.
2. Viáticos: comprenden los gastos por concepto de alimentación, hospedaje y movilidad (hacia y desde el lugar de embarque), así como el desplazamiento en el lugar donde se realizan las actividades. El concepto de viáticos es aplicable para estancias cuya duración sea menor a los quince (15) días calendario, considerando los topes máximos diarios detallados en el Anexo 2.
3. Manutención: comprenden los gastos de alojamiento, alimentación y movilidad local durante su permanencia en el lugar sede del objeto del beneficio otorgado, o desplazamientos relacionados con el mismo. El concepto de manutención es aplicable siempre que se trate de una estancia cuya duración sea mayor o igual a quince (15) días calendario, considerando los topes máximos diarios detallados en la convocatoria.
4. Seguro de viaje: el seguro es de carácter obligatorio y su valor debe estar de acuerdo al precio de mercado. La cobertura típicamente incluye gastos médicos de emergencia, muerte accidental, invalidez e imprevistos logísticos durante el viaje (retraso de vuelos, demora o pérdida de equipaje, robos, etc.). El precio del seguro puede variar en función a la edad, duración del viaje y el destino. Se puede financiar hasta un máximo de S/ 2,000.

• Servicios de no consultoría.

Corresponde a los gastos de contratación de personas naturales o jurídicas para la ejecución de actividades de índole técnica especializada, consideradas como críticas para lograr el buen resultado del proyecto de investigación: servicios de laboratorio, colección de datos, procesamiento de muestras, análisis y diseño.

• Otros servicios

Corresponde a los gastos de contratación de personas naturales o jurídicas para la ejecución de actividades complementarias del proyecto de investigación, tales como:

1. Actividades de difusión:

1. Gastos de organización de taller de cierre del proyecto.
2. Costo de publicación de artículos en revistas indizadas.

• Costo de inscripción para participar en eventos o para discutir los resultados con personal interesado o calificado.

1. Actividades complementarias de la investigación:

1. Gastos de importación y desaduanaje de materiales, insumos o equipos relacionados al proyecto de investigación que se adquieran en el extranjero.
2. Gastos relacionados a la obtención del título o grado.

• Gastos relacionados a la solicitud de patentes.

1. Gastos de mantenimiento correctivo para los equipos adquiridos u otro equipo de laboratorio que deba usarse en el proyecto.

• Gastos de gestión (hasta 10% del monto financiado)

Corresponde al incentivo monetario para el coordinador administrativo, útiles de oficina y servicios de imprenta.